在意大利宣布参战的当天夜里，意海军首批潜艇49艘就开始展开在地中海，遂行破交、布雷等战斗任务。到6月底，这批潜艇陆续返回基地。第二批潜艇于6月下旬开始在东地中海和西地中海展开，遂行以破交为主的作战任务。
在东地中海：克里特岛以西海域有“鲍鱼”号，克里特岛以南海域有“曼纳拉”号和“梅诺提”号；在埃及的塞卢姆附近有“塞赖纳”号；在亚历山大港附近海域有“鲁比诺”号；在法马古斯塔附近有“抑济”号；在爱琴海的接近航道上有“代耳菲诺”号、“鲨鱼”号、“布林”号和“特里柴寇”号。其中，“塞赖纳”号于6月21日受到英巡洋舰的攻击，被深弹击伤，随后被拖到托卜鲁克港。
在西地中海：在热那亚湾，有“H－1”、“H－4”、“H－8”号潜艇；在法、意交界处的里维埃拉附近海域，有“菲埃腊默斯卡”号、“冈达”号；在利翁湾，有“阿拉达姆”号、“莫塞奈果”号和“马拉彻特”号；在巴利阿里群岛附近，有“邦迪埃腊”号、“阿斯西阿菲”号、“圣塔果萨”号和“纳尼”号；在阿尔及尔近岸海域有“格劳克”号、“塔泽耳”号、“塔提”号；在比塞大附近海域，有“迈达萨”号、“马塞勒”号；在突尼斯海峡，有“卡波尼”号、“达普勒西达”号和“皮萨尼沃”号。其中，“格劳克”号击伤1艘商船(3657吨)，“卡波尼”号击沉1艘商船。